测量线粒体功能的黄金标准 ——安捷伦Seahorse XF细胞线粒体压力测试试剂盒

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安捷伦Seahorse XF细胞线粒体压力测试试剂盒是用于评估线粒体功能的优化解决方案。可在一次分析中获得多个参数,包括:线粒体基础呼吸、ATP产生关联呼吸、最大呼吸、备用呼吸能力以及非线粒体呼吸等。这一标准检测方法已发表于数百篇文章中,成功增进了我们对细胞代谢在细胞生理学、疾病病理学和病因学研究中所发挥作用的理解。

实验背景:

线粒体功能测定是了解细胞活化、增殖、分化和功能障碍的关键。安捷伦 Seahorse XF细胞线粒体压力测试通过在Seahorse细胞能量代谢分析系统上直接测量细胞的氧消耗速率 (OCR) 来表征线粒体功能的关键参数,能提供完整的线粒体代谢功能状态,揭示用基础代谢测定无法提供的关键信息。Seahorse XF细胞线粒体压力测试是测量细胞线粒体功能的金标准,被广泛应用。本实验为了解线粒体功能障碍的原因和深入理解代谢途径、信号和表型提供了全新视角。

实验原理:

Seahorse XF细胞线粒体压力测试实验使用XF传感器探针板内置的加药孔,在实验过程中实时将呼吸作用的调节剂加入细胞孔中,从而得到反映线粒体功能的关键参数。实验试剂盒里的调节剂为寡霉素 (Oligomycin)、羰基氰-4 (三氟甲氧基)苯腙(Carbonyl cyanide-4(trifluoromethoxy) Phenylhydrazone, FCCP)、鱼藤酮 (Rotenone)和抗霉素A (Antimycin A)

OligomycinATP合酶(复合物V)抑制剂,是实验中在基础测量之后第一次注射的化合物。它影响或减少通过ETC的电子流,导致线粒体呼吸或OCR减少。减少的OCR与细胞ATP的产生相关。

FCCP是解偶联剂,它可以破坏质子梯度和线粒体膜电位。它是Oligomycin注射后第二次注射的化合物。加入后通过ETC的电子流不受限制使复合物IV耗氧量达到最大。FCCP激发的OCR可用来计算备用呼吸能力。备用呼吸能力是衡量细胞对增加的能量需求或压力的反应能力。

Rotenone是复合物I的抑制剂,Antimycin A是复合物III的抑制剂。第三次注射二者的混合物,它们联合关闭了线粒体呼吸,从而能够计算由线粒体外的过程驱动的非线粒体呼吸耗氧。

实验优势:

线粒体功能测定是了解细胞活化、增殖、分化和功能障碍的关键。安捷伦Seahorse XF细胞线粒体压力测试试剂盒能提供完整的线粒体代谢功能状态,揭示用基础代谢测定无法提供的关键信息及数据。该分析有助于深入了解线粒体功能紊乱机制,还可研究在不同细胞类型、候选药物之间以及遗传或生化干扰下的功能差异。

词汇表:

文献应用:

1iPSC-derived homogeneous populations of developing schizophrenia cortical interneurons have compromised mitochondrial function

 

Dysregulation of OxPhos genes in SCZ cINs resulted in defects in mitochondrial function

Reversal of OxPhos deficits with chemical treatment

2Irisin protects mitochondria function during pulmonary ischemia/reperfusion injury

OCR of lung tissue from IR injured mice

3Targeting p53 and histone methyltransferases restores exhausted CD8+ T cells in HCV infection

Mitochondrial metabolism is impaired in HCV-specific CD8+ T cells from chronically evolving acute patients

4Acyl-CoA-Binding Protein Drives Glioblastoma Tumorigenesis by Sustaining Fatty Acid Oxidation

Fatty Acid Oxidation in GBM Depends on ACBP Expression

声明:仅供研究使用,不用于诊断性操作。

版权说明:版权归原作者及安捷伦细胞团队,本文内容部分来源于美国安捷伦科技公司官网(www.agilent.com)。如有问题请联系小编,欢迎批评指正,衷心感谢!

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2020年7月16日 11:19
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